小龍醫師館

了解IMViC試驗

　　IMViC試驗主要用於腸道桿菌科中主要組別的鑑定，因依其對特異受質的生化性質與酶反應來決定。必須了解培養基中加入哪一種指示劑，最終反應呈現何種顏色變化。 　　之前曾在基礎醫學教室曾談到腸道桿菌科的特性及致病，其中有一項IMViC試驗，相信大家對其不是太熟悉，今日特此欄目略加解說，希望對大家考試有幫助。IMViC試驗包含四個測試：I是蚓垛產生試驗(Indole production test)，M是甲基紅試驗(methyl red test)，Vi是伏普試驗(Voges Proskauer test)，C是檸檬酸鹽利用試驗(citrate utilization test)。

分述如下：

蚓垛產生試驗 (Indole production test)	利用色氨酸酶 (tryptophanase) 可將色氨酸 (tryptophan) 轉變為 indole + pyruvic acid + ammonia 等原理，來進行 腸道桿菌科組別的鑑定 。實驗培養中使用 SIM 瓊脂，內含色氨酸當作受質，若細菌含色氨酸酶，可分解色氨酸而產生 indole，並且加入柯瓦克試劑(Kovac reagent)時會呈櫻桃紅色
甲基紅測試 (Methyl red test)	利用葡萄糖發酵時可產生大量的酸性產物，若加入甲基紅指示劑，則呈現紅色變化的原理來進行 腸道桿菌科組別的鑑定(變色範圍 pH4.4 紅色~pH6.0 黃色)，主要用以區分E. coli 和 Enterogenes aerogenes。二者在培養初期均可產生有機酸產物，但前者培養結束時，培養基內可維持 pH=4 範圍，而後者還可將酸性產物轉為 pH=6 左右的中性產物，如乙醇或乙醯甲基甲醇 (acetylmethylcarbinol) 。出現紅色為陽性反應，出現黃色為陰性結果
伏普試驗 (Voges Proskauer test)	測定細菌代謝葡萄糖後產生有機酸，然後在進一步分解，轉變為中性產物。若中性產物乙醯甲基甲醇(acetylmethylcarbinol)在培養基中加入巴利特氏試劑(Barritts reagent)，15mins 內則呈現深玫瑰色，這時可證實產物乙醯甲基甲醇存在，此為陽性反應，如無變化，則為陰性結果
檸檬酸鹽利用試驗 (Citrate utilization test)	有些細菌在缺乏葡萄糖或乳糖情況下，轉而利用檸檬酸鹽 (citrate) 為生長能量的來源。當菌體產生檸檬酸鹽酶 (citrase) 作用於培養基中的檸檬酸鹽時，可分解產生草醋酸 (oxalacetic acid) 與醋酸鹽 (acetic acid) ，此產物再經酶的作用後再轉變為丙酮酸 (pyruvic acid) 與 CO2，所產生之 CO2 與 H2O 結合成碳酸鈉，而成鹼性產物，使培養基中 pH 值升高，加入溴瑞香草藍時，顏色可由綠色變為藍色，表陽性反應。陰性反應則不會有菌生長，且培養基維持綠色

IMViC、腸道桿菌、蚓垛產生試驗、甲基紅試驗、甲基紅試驗、檸檬酸鹽利用試驗、基礎醫學資訊館